การผลิตและลักษณะสมบัติของโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อเอนโรฟลอกซาซิน

Abstract

เอนโรฟลอกซาซินเป็นสารปฏิชีวนะสังเคราะห์ในกลุ่มฟลูออโรควิโนโลน ใช้มากทั้งในการรักษาและป้องกันโรคติดเชื้อแบคทีเรียทั้งแกรมบวกและแกรมลบในสัตว์ เอนโรฟลอกซาซินจึงตกค้างอยู่ในเนื้อสัตว์และเข้าสู่ห่วงโซ่อาหารได้ และยังเป็นการกระตุ้นให้แบคทีเรียเกิดการกลายพันธ์และดื้อยา จึงได้มีการจำกัดปริมาณเอนโรฟลอกซาซินที่ตกค้างในอาหารบริโภค ในการวิจัยนี้จึงได้ผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อเอนโรฟลอกซาซิน เพื่อนำแอนติบอดีไปพัฒนาเป็นชุดตรวจสำหรับตรวจปริมาณเอนโรฟลอกซาซิน ในการผลิตเซลล์ไฮบริโดมาที่ผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อเอนโรฟลอกซาซินนั้น ได้ทำการหลอมรวมเซลล์ทั้งหมด 5 ครั้ง ได้เซลล์ไฮบริโดมาที่ผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อเอนโรฟลอกซาซิน และคัดเลือกมา 4 โคลนคือโคลน รหัส #44, #45, #47 และ #48 ที่ได้จากการหลอมรวมเซลล์ครั้งที่ 4 จากการศึกษาสมบัติของโมโนโคลนอลแอนติบอดี พบว่าโมโนโคลนอลแอนติบอดีทั้งหมดนี้มี subclass เป็น IgG1 และมีความจำเพาะอย่างสูงต่อเอนโรฟลอกซาซินโดยมีค่า IC50 อยู่ในช่วง 0.15-0.19 ng/ml มีค่า LOD อยู่ในช่วง 0.0014-0.0029 ng/ml มีปฏิกิริยาข้ามต่อสารปฏิชีวนะอื่นๆ ในกลุ่มควิโนโลนและฟลูออโรควิโนโลนน้อยกว่า 0.01%