การศึกษาการสังเคราะห์นิโคตินกัมมันตรังสีจากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อนิโคติอะนาทาแบคคุม

Abstract

ได้ศึกษาการสังเคราะห์นิโคตินกัมมันตรังสี โดยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อที่ไม่เจริญเป็นส่วนของต้นพืชจากต้นยาสูบพันธุ์ นิโคติอะนาทาแบคคุม สายพันธุ์ เคนทักกิ 14 ที่ผ่านการทำให้ปลอดเชื้อ กับกรดนิโคตินิก-ทริเทียม ซึ่งเตรียมจากการอาบรังสินิวตรอนร่วมกับเกลือลิเทียม ในอาหารเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อแบบวุ้น Murashige – Skoog (M&S) ซึ่งประกอบไปด้วยออกซิน α – napthaleneacetic acid (NAA) 1 ไมโครโมล และไคนิติน 1 ไมโครโมล, ความเป็นกรดด่าง 5.7 ทำการเพาะเลี้ยงภายใต้สภาวะอุณหภูมิ 25±2 องศาเซลเซียส ความชื้นสัมพันธ์ 30 – 40 % ในที่มืด โดยแบ่งการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเป็น 2 แบบ คือ แบบใต้อาหารครั้งเดียวเมื่อเริ่มต้น (batch) และแบบเปลี่ยนอาหารเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ (Continuous flow) ปรากฏว่าการสังเคราะห์นิโคตินโดยอาศัยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อแบบให้อาหารครั้งเดียวเมื่อเริ่มต้น จะได้ปริมาณนิโคตินสูงกว่าการสังเคราะห์นิโคตินโดยอาศัยการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเมื่อเปลี่ยนอาหารเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ 3 ครั้ง ในระยะเวลาเท่ากัน คือ 6 สัปดาห์ จากการทดลองได้ผลผลิตปริมาณนิโคติน-ทริเทียมคิดเป็น 1.15 มิลลิกรัม ต่อ อาหารเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ M&S 30 มิลลิลิตร, อัตราส่วนระหว่าง นิโคตินกับสารตั้งต้น คือ กรดนิโคตินิก เป็น 7.14 %, ความบริสุทธิ์ทางเคมิของนิโคติน-ทริเทียมที่ได้เป็น 72.79 % ไม่พบไอโซโทปรังสิแกมมาและไอโซโทปอื่น ๆ นอกจากทริเทียมปนในผลผลิต ผลผลิตมีความแรงรังสีจำเพาะ 1.18 x 10⁻⁵ คูริต่อมิลลิกรัมนิโคติน ซึ่งสามารถนำไปใช้เป็นสารติดตามได้