Please use this identifier to cite or link to this item: https://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/84262
Full metadata record
DC FieldValueLanguage
dc.contributor.advisorPattarin Tangtanatakul-
dc.contributor.advisorPimpayao Sodsai-
dc.contributor.authorTerdkiat Phonboon-
dc.contributor.otherChulalongkorn University. Graduate School-
dc.date.accessioned2024-02-05T10:09:38Z-
dc.date.available2024-02-05T10:09:38Z-
dc.date.issued2023-
dc.identifier.urihttps://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/84262-
dc.descriptionThesis (M.Sc.)--Chulalongkorn University, 2023-
dc.description.abstractSTAT4 (Signal Transducer Activator of Transcription factor 4) polymorphisms are risk factors contributing to autoimmune disease. While STAT4 is dominant in promoting interferon-γ in T lymphocytes and NK cells, its existence and function in dendritic cells (DCs) are still absent. To characterize the STAT4 in human DCs, we isolated dendritic cells from buffy coat of healthy blood donors (n = 6). The dendritic cells are enriched and specifically sorted into 3 subtypes including plasmacytoid dendritic cells (pDCs, CD123+), CD8+ priming dendritic cells (cDC1, CLEC9A+), and CD4+ priming dendritic cells (cDC2/3, CD1c+) using magnetic separation and flow cytometry. By quantitative PCR and western blotting, the presence of STAT4 gene expression as well as phosphorylated STAT4 was determined in both IFN-β-induced dendritic cell maturation and immature dendritic cells ex vivo. In addition, we study the role of STAT4 by performing lisofylline inhibition and cytokine secretion. Regarding our analysis, the percentages of each dendritic cell subset are 0.07% for pDC, 0.04% for cDC1, and 0.31% for cDC2/3 in healthy blood donors. The IFN-β-enhanced STAT4 expression and phosphorylated STAT4 were prominent in mature dendritic cells, especially in cDC2/3, but not in pDC and cDC1 (p-value < 0.01). As cDC1 and cDC2/3 are responsible for T-cell priming, this indicated that IFN-β-induced STAT4 might be crucial in regulating dendritic cells producing IFN-γ. In addition, STAT4 and pSTAT4 were not inhibited by lisofylline pretreatment. Lastly, we found that the secretion of IFN-α2 was increased in cDC2/3 after IFN-β stimulation. Our study highlights the significance of STAT4 in dendritic cells which might be involved in the IFN-mediated autoimmune diseases.-
dc.description.abstractalternativeSNPs ของ STAT4 มีความเกี่ยวข้องกับการเกิดโรคภูมิแพ้ตนเองชนิดต่างๆ แม้ว่าจะมีบทบาทสำคัญในการกระตุ้นการสร้าง IFN-γ ในเซลล์เม็ดเลือดขาวหลายชนิด แต่ข้อมูลเกี่ยวกับการแสดงออกและหน้าที่ของ STAT4 ใน dendritic cell (DC) แต่ละชนิดนั้นยังมีอยู่อย่างจำกัด ดังนั้นเพื่อต้องการศึกษาการแสดงออกและบทบาทของ STAT4 ใน DC ผู้วิจัยได้ทำการแยก DC จากผู้บริจาคที่มีสุขภาพดีจำนวน 6 ราย ด้วยวิธี magnetic isolation ตามด้วย flow cytometry ในการแยก dendritic cell ออกเป็น 3 ชนิดย่อย คือ plasmacytoid dendritic cell (pDC; CD123+), conventional dendritic cell 1 (cDC1; CLEC9A+), และ conventional dendritic cell 2/3 (cDC2/3; CD1c+) หลังจากนั้นจะนำ DC ที่ได้ไปกระตุ้นด้วย IFN-β เพื่อวัดการแสดงออกของยีน STAT4 ด้วย Real-Time PCR และ โปรตีน STAT4 ด้วย Western blotting โดย DC ที่มีการแสดงออกของ STAT4 จะถูกนำมาศึกษาบทบาทด้วยวิธี lisofylline inhibition และวัดการหลั่ง Cytokine หลังถูกกระตุ้น จากผลการทดลองพบว่าจำนวน pDC, cDC1, และ cDC2/3 ในผู้บริจาคมีค่าเฉลี่ยประมาณ 0.07%, 0.04% และ 0.31% เป็นที่น่าสนใจว่าเมื่อนำ DC มากระตุ้นด้วย IFN-β แล้วมีเพียง cDC2/3 เท่านั้นที่มีการแสดงออกของยีน STAT4 และโปรตีน pSTAT4 เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ และส่งผลให้มีการหลั่ง IFN-α2 สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ยิ่งไปกว่านั้น Lisofylline ยังไม่สารยับยั้งการถูกกระตุ้นของโปรตีน pSTAT4 จากการศึกษานี้ได้แสดงให้เห็นว่า STAT4 อาจมีบทบาทที่สำคัญในการควบคุมการตอบสนองของ DC ในสภาวะที่ถูกกระตุ้นให้เกิดการอักเสบได้-
dc.language.isoen-
dc.publisherChulalongkorn University-
dc.rightsChulalongkorn University-
dc.subject.classificationImmunology and Microbiology-
dc.subject.classificationHuman health and social work activities-
dc.subject.classificationMedicine-
dc.titleThe role of STAT4 transcription factor in purified human Dendritic cells treated with interferon-beta, an autoimmune disease model-
dc.title.alternativeการศึกษาบทบาทของแสตดสี่ในเซลล์เม็ดเลือดขาวชนิดเดนไดร์ตที่ถูกกระตุ้นด้วยอินเตอร์เฟียรอนชนิดเบต้าแบบจำลองในโรคภูมิแพ้ตนเอง-
dc.typeThesis-
dc.degree.nameMaster of Science-
dc.degree.levelMaster's Degree-
dc.degree.disciplineMedical Microbiology-
dc.degree.grantorChulalongkorn University-
Appears in Collections:Grad - Theses

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
6480009120.pdf1.77 MBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.