การศึกษาระดับจุลกายวิภาคศาสตร์ของแหล่งกักเก็บอสุจิในสุกรภายหลังการผสมเทียมแบบสอดท่อเข้ามดลูกด้วยน้ำเชื้อสด : รายงานวิจัย

เผด็จ ธรรมรักษ์; ไพศาล เทียนไทย

Please use this identifier to cite or link to this item: https://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/8942

Title:	การศึกษาระดับจุลกายวิภาคศาสตร์ของแหล่งกักเก็บอสุจิในสุกรภายหลังการผสมเทียมแบบสอดท่อเข้ามดลูกด้วยน้ำเชื้อสด : รายงานวิจัย
Other Titles:	A histological study on the sperm reservoir of the sow after an intrauterine artificial insemination with extended fresh semen
Authors:	เผด็จ ธรรมรักษ์ ไพศาล เทียนไทย
Email:	Padet.T@Chula.ac.th fvetpth@chulkn.chula.car.ac.th
Other author:	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. คณะสัตวแพทยศาสตร์ จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. คณะสัตวแพทยศาสตร์
Subjects:	อสุจิ สุกร -- การผสมเทียม
Issue Date:	2552
Publisher:	จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
Abstract:	วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้ คือ เพื่อตรวจหาจำนวนอสุจิใน crypts ของ uterotubal junction (UTJ) และท่อนำไข่ในแม่สุกร ที่ประมาณ 24 ชั่วโมง หลังทำการผสมเทียมด้วยวิธี intrauterine (IUI) และ deep intrauterine (DIUI) และทำการเปรียบเทียบกับจำนวนตัวอสุจิเมื่อใช้วิธีการผสมเทียมแบบปกติ การทดลองใช้แม่สุกรพันธุ์ผสม Landrace x Yorkshire (LY) จำนวน 15 ตัว หาเวลาที่เกิดการตกไข่ที่สัมพันธ์กับพฤติกรรมการเป็นสัดโดยทำการอัลตราซาวนด์ผ่านทางทวารหนักทุก 4 ชั่วโมง ผสมเทียมแม่สุกรด้วยน้ำเชื้อสดเจือจางเพียงครั้งเดียวที่เวลาประมาณ 6-8 ชั่วโมงก่อนเวลาที่คาดว่าจะมีการตกไข่ด้วยวิธี AI (n=5) IUI (n=5) และ DIUI (n=5) โดยทำการผสมเมื่อสุกรเป็นสัดครั้งที่สองหลังจากหย่านม วิธี AI ใช้อสุจิ 3,000 ล้านตัวในปริมาตร 100 มิลลิลิตร วิธีIUI ใช้อสุจิ 1,000 ล้านตัวในปริมาตร 50 มิลลิลิตร และวิธี DIUI ใช้อสุจิ 150 ล้านตัวในปริมาตร 5 มิลลิลิตร หลังจากผสมเทียมประมาณ 24 ชั่วโมง ทำการวางยาแม่สุกรเพื่อตัดรังไข่และมดลูกออก เก็บท่อนำไข่และปีกมดลูกส่วนต้น (1 เซนติเมตร) ทั้งสองข้าง แบ่งเป็น 4 ส่วน ได้แก่ UTJ ส่วนท้ายของ isthmus ส่วนต้นของisthmus และ ampulla ชะล้างตัวอสุจิที่อยู่ในท่อของแต่ละส่วนด้วยสารละลาย phosphate buffer หลายๆ ครั้งหลังจากทำการชะล้างแล้ว นำส่วน UTJ และท่อนำไข่ทุกส่วนไปแช่ในสารละลาย 10% neutral buffered formalin จากนั้นนำ UTJ และส่วนต่างๆ ของท่อนำไข่ไปตัดแบ่งเป็น 4 ส่วนเท่า ๆ กันและนำไปใส่ใน paraffin block ทำการตัดขวางเนื้อเยื่อที่ความหนา 5 ไมครอน ชิ้นเนื้อเยื่อที่ตัดได้ทุกๆ 5 ชิ้นจะนำไปย้อมสีด้วยสีย้อม haematoxylin และ eosin นับจำนวนตัวอสุจิทั้งหมดจาก 32 ชิ้นในแต่ละส่วนของเนื้อเยื่อ (16 ชิ้นจากด้านซ้ายและอีก 16 ชิ้นจากด้านขวา) ด้วยกล้องจุลทรรศน์ ผลการศึกษาพบว่าตัวอสุจิส่วนใหญ่จะอยู่กันเป็นกลุ่มบริเวณepithelial crypt ค่าเฉลี่ยของจำนวนตัวอสุจิทั้งหมดในแหล่งกักเก็บตัวอสุจิ (UTJ และส่วนท้ายของ isthmus) เป็น2296 729 และ 22 ตัวในกลุ่มที่ผสมเทียมด้วยวิธี AI IUI และ DIUI ตามลำดับ (P<0.01) แม่สุกรทุกตัวในกลุ่มที่ผสมเทียมด้วยวิธี AI และ IUI จะพบตัวอสุจิในแหล่งกักเก็บตัวอสุจิได้ทั้งสองข้าง แต่แม่สุกรในกลุ่มที่ผสมเทียมด้วยวิธี DIUI จำนวน 3 ตัวจาก 5 ตัวไม่พบตัวอสุจิในแหล่งกักเก็บตัวอสุจิทั้งสองข้าง แม่สุกร 1 ตัวพบตัวอสุจิในแหล่งกักเก็บตัวอสุจิเพียงข้างเดียว และแม่สุกรอีก 1 ตัวพบตัวอสุจิได้ทั้งสองข้าง ไม่พบตัวอสุจิในส่วนต้นของisthmus ขณะที่พบตัวอสุจิเพียง 1 ตัวในส่วน ampulla ในแม่สุกร 1 ตัวจากกลุ่มที่ผสมเทียมด้วยวิธี IUI โดยสรุปการผสมเทียมด้วยวิธี DIUI จะพบจำนวนตัวอสุจิในแหล่งกักเก็บตัวอสุจิที่ 24 ชั่วโมงหลังทำการผสมเทียมน้อยกว่าเมื่อเทียบกับวิธี AI และ IUI อย่างมีนัยสำคัญ ตัวอสุจิสามารถไปอยู่ในแหล่งกักเก็บตัวอสุจิได้ทั้งสองข้างหลังทำการผสมเทียมด้วยวิธี AI และ IUI แต่ในแม่สุกรกลุ่มที่ทำการผสมเทียมด้วยวิธี DIUI พบได้เพียง 1 ตัวจาก 5 ตัว
Other Abstract:	The aim of this study was to investigate the number of spermatozoa in the crypts of the uterotubal junction (UTJ) and the oviduct of sows approximately 24 h after intrauterine insemination (IUI) and deep intrauterine insemination (DIUI) and compared with that of conventional artificial insemination (AI). Fifteen crossbred Landrace x Yorkshire (LY) multiparous sows were used in the experiment. Transrectal ultrasonography was performed every 4 h to examine the time of ovulation in relation to oestrous behaviour. The sows were inseminated with a single dose of diluted fresh semen by the AI (n = 5), IUI (n = 5) and DIUI (n = 5) at approximately 6–8 h prior to the expected time of ovulation, during the second oestrus after weaning. The sperm dose contained 3000x106 spermatozoa in 100 ml for AI, 1,000 x 106 spermatozoa in 50 ml for IUI and 150x106 spermatozoa in 5 ml for DIUI. The sows were anaesthetized and ovario-hysterectomized approximately 24 h after insemination. The oviducts and the proximal part of the uterine horns (1 cm) on each side of the reproductive tracts were collected. The section was divided into four parts, i.e. UTJ, caudal isthmus, cranial isthmus and ampulla. The spermatozoa in the lumen in each part were flushed several times with phosphate buffer solution. After flushing, the UTJ and all parts of the oviducts were immersed in a 10% neutral buffered formalin solution. The UTJ and each part of the oviducts were cut into four equal parts and embedded in a paraffin block. The tissue sections were transversely sectioned to a thickness of 5 lm. Every fifth serial section was mounted and stained with haematoxylin and eosin. The total number of spermatozoa from 32 sections in each parts of the tissue (16 sections from the left side and 16 sections from the right side) was determined under light microscope. The results reveal that most of the spermatozoa in the histological section were located in groups in the epithelial crypts. The means of the total number of spermatozoa in the sperm reservoir (UTJ and caudal isthmus) were 2296, 729 and 22 cells in AI, IUI and DIUI groups, respectively (p < 0.01). The spermatozoa were found on both sides of the sperm reservoir in all sows in the AI and the IUI groups. For the DIUI group, spermatozoa were not found on any side of the sperm reservoir in three out of five sows, found in unilateral side of the sperm reservoir in one sow and found in both sides of the sperm reservoir in one sow. No spermatozoa were found in the cranial isthmus, while only one spermatozoon was found in the ampulla part of a sow in the IUI group. In conclusion, DIUI resulted in a significantly lower number of spermatozoa in the sperm reservoir approximately 24 h after insemination compared with AI and IUI. Spermatozoa could be obtained from both sides of the sperm reservoir after AI and IUI but in one out of five sows inseminated by DIUI.
URI:	http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/8942
Type:	Technical Report
Appears in Collections:	Vet - Research Reports

Files in This Item:

File	Description	Size	Format
Padet_his.pdf		1.2 MB	Adobe PDF	View/Open

Show full item record